400-166-8600
qPCR Kit (经典法)

英文:Venor®Gem qEP

品牌:MB

货号:11-9025

规格:25次/盒

用途:用于【细胞和生物制品】及其生产过程中【支原体】污染的检测

价格:¥13300

会员价: 请登录
数量
收藏此商品

    qPCR Kit  (经典法)

    Venor®Gem qEP

     

    品名

    货号

    规格

    价格

    qPCR Kit  (经典法)

    Venor®Gem qEP

    11-9025

    25次/盒

    13300元

    11-9100

    100次/盒

    43200元

    11-9250

    250次/盒

    87900元


     支原体qPCR法介绍:

    荧光定量PCR法(qPCR):是在常规PCR基础上,将『针对支原体特异性保守序列的探针』做荧光标记,使PCR扩增后的产物带有荧光,利用荧光信号的变化和配套软件,进行DNA扩增反应的实时监测,简称qPCR。

    优点:①灵敏度高、特异性强。

              ②时间短,2-3小时出结果。

              ③检测结果可定量。

              ④操作简便。

    缺点:①对于已做支原体灭活处理的样品,由于支原体DNA仍旧存在其中,PCR结果会出现假阳性。(可用培养法做补充验证)

              ②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大(由于引物及内在设计不同),需谨慎选择,尽量在专业人员推荐指导下使用。



    『支原体qPCR检测试剂盒』介绍

    德国MB公司生产的支原体qPCR检测试剂盒(均为探针法检测),依据操作步骤的细微差别,

    分『经典法』和『一步法』两种。    

    此两类试剂盒较全球其他厂家同类产品,具有以下独特的优点:

    ①经典法qPCR试剂盒遵循欧洲药典流程要求

    ②高特异性,一次检测即可涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种(涵盖欧洲药典规定的9种支原体),根据序列一致性,至少可以检测到107种支原体物种。操作简单,易于观察。

    (使用MB的试剂盒,下表中列出的支原体物种均为阳性,其他微生物或真核细胞均为阴性,无交叉反应)

    ③高灵敏度,MB公司的经典法试剂盒最低检测限可达到≤10CFU/ml。

    MB公司的一步法qPCR试剂盒最低检测限≥50个基因组/反应。

     

    ④MB公司有相应配套的10CFU/100CFU的敏感度测试的标准品,便于方法学验证。

    MB公司有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。

    MB公司有相应配套的支原体绝对定量标准品,便于最后定量检测。



    特点

    1. 内控对照为独立包装,遵循欧洲药典和日本药典操作流程。

    2. 高特异性,一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种(包括欧洲药典规定的9种支原体)。与细菌和真核DNA无交叉反应。

    3. 高灵敏度,最低检测限可达到≤10CFU/ml。 

    4. 有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。

    5.有相应配套的支原体绝对定量标准品,便于最后定量检测。


    操作步骤

    1步:样本处理

    a.细胞培养上清

    b. 生物药或需遵循药典的样本 

    说明:①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。

              ②细胞培养物样本含丰富的DNA酶,在低温下也能降解支原DNA,影响检测灵敏度。

              建议:样本做DNA抽提处理,实现最高灵敏度。

              推荐:德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒

              Venor® Gem Sample Preparation Kit

              该DNA抽提试剂盒已经过广泛验证。


    2步:试剂制备

    a. 冻干粉溶解

     

    b. 反应体系制备

    b1) 样品为细胞上清筛查——反应体系制备

     

    b2) 样品为生物药——反应体系制备

     

    3步:启动荧光定量PCR仪

     

    4步:结果判别

    FAM通道:检测支原体荧光信号。HEX通道:检测内控对照荧光信号。

    支原体DNA和内控DNA存在信号的竞争性抑制。

    支原体DNA越多,FAM通道信号越高,检测内控对照的HEX通道信号越低。

    定量需基于Ct值和DNA标准曲线。

    Ct<40为阳性结果。Ct≥40为阴性结果。

     

    示意图:

     


    储存条件

    2~8℃保存至少12个月。复溶后-18℃以下保存。

     

    效期

    1年6个月


    (缔一生物)


    本网站所有注明“来源:缔一生物”的文字、图片和音视频资料,版权均属于北京缔一生物网站所有。非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,否则将追究法律责任。取得书面授权转载时,须注明“来源:缔一生物”。



购买须知
点击确认会有专业人员与您联系或拨打400-166-8600电话,可立即和专业销售人员沟通
© 2019 版权所有 京ICP备19056719号 Designed by Wanhu