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Schneider昆虫培养基干粉,含L-谷氨酰胺,不含氯化钙和碳酸氢钠

英文:Schneider's Insect Medium,With L-Glutamine,Without Calcium Chloride and Sodium bicarbonate

品牌:HiMedia

货号:IM003

规格:1L/袋

用途:【昆虫细胞】培养。

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    Schneider's昆虫培养基干粉,含L-谷氨酰胺,不含氯化钙和碳酸氢钠

    Schneider'sInsect MediumWith L-GlutamineWithout Calcium Chlorideand Sodium bicarbonate


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    IM003

    Schneider's昆虫培养基干粉,含L-谷氨酰胺,不含氯化钙和碳酸氢钠

    Schneider's Insect MediumWith L-GlutamineWithout Calcium Chloride and Sodium bicarbonate

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    背景

    Schneider's昆虫培养基经过专门配方,用于体外培养果蝇细胞和组织。现已从果蝇衍生出许多细胞系,并且被广泛用于遗传和分子生物学研究。果蝇细胞也用于研究重组蛋白表达。


    使用说明

    1.   26.2g干粉溶于900ml组织培养级纯水中,持续轻轻搅拌以使完全溶解。请勿加热。

    2.   加入0.4g碳酸氢钠干粉(货号TC230)或5.3ml7.5%碳酸氢钠溶液(货号TCL013),搅拌直至溶解。

    3.   1N NaOHpH值调至9.2±0.2,持续搅拌,溶液可能浑浊。

    4.   1N HClpH调节至6.7±0.2,持续搅拌。溶液将变得澄清。

    5.   每升培养基添加0.6g无水氯化钙。先在组织培养级别水中溶解0.6g无水氯化钙(货号TC097)以制备氯化钙溶液。再向培养基中缓慢添加溶液,并不断搅拌以避免沉淀形成。

    6.   1N HCl1N NaOHpH值调至所需值以下0.1-0.3单位,因为培养基过滤后pH趋于升高。补足最终体积至1000ml

    7.   将渗透压调节至340-360mOsm/kg H2O。可通过添加0.3g/L氯化钾(货号TC010)或0.4g/L氯化钠(货号TC046),使渗透压增加10mOsm/kgH2O。每升培养基每加入27.8毫升水,可使渗透压减少10mOsm/kgH2O

    8.   立即用孔隙≤0.22µm的膜滤器过滤灭菌。

    9.   如需要,无菌加入已灭菌的添加剂,并将灭菌培养基分装至无菌容器中。

    10. 液体培养基在2-8避光储存,直至使用。


    组成

    成份

    mg/L

    无机盐

    磷酸氢二钠

    700.000

    七水硫酸镁

    3700.000

    氯化钾

    1600.000

    磷酸二氢钾

    450.000

    氯化钠

    2100.000

    氨基酸

    甘氨酸

    250.000

    L-精氨酸盐酸盐

    483.810

    L-天冬氨酸

    400.000

    L-盐酸半胱氨酸

    78.000

    L-胱氨酸二盐酸盐

    100.000

    L-谷氨酸

    800.000

    L-谷氨酰胺

    1800.000

    L-组氨酸盐酸盐一水合物

    540.000

    L-异亮氨酸

    150.000

    L-亮氨酸

    150.000

    L-赖氨酸盐酸盐

    1650.000

    L-蛋氨酸

    800.000

    L-苯丙氨酸

    150.000

    脯氨酸

    1700.000

    L-丝氨酸

    250.000

    L-苏氨酸

    350.000

    L-色氨酸

    100.000

    L-酪氨酸二钠盐

    620.000

    缬氨酸

    300.000

    ß-丙氨酸

    500.000

    其他

    α-酮戊二酸

    200.000

    D+)葡萄糖

    2000.000

    D+)海藻糖

    2000.000

    富马酸

    100.000

    L-苹果酸

    100.000

    琥珀酸

    100.000

    酵母提取物

    2000.000


    需要而未提供的其他材料

    组织培养级水(货号TCL010

    碳酸氢钠(货号TC230

    碳酸氢钠溶液7.5%(货号TCL013

    1N盐酸(货号TCL003

    1N氢氧化钠(货号TCL002

    氯化钠(货号TC046

    无水氯化钙(货号TC097

    氯化钾(货号TC010

    胎牛血清(货号VS500T,或VW500T


    质量控制

    外观

    米黄色至乳白色均匀粉末。


    溶解度

    26.2g/L透明溶液


    无碳酸氢钠的pH

    4.20-4.80


    加碳酸氢钠后的pH

    4.80-5.40


    未加碳酸氢钠的渗透压

    260.00-300.00


    加碳酸氢钠后的渗透压

    270.00-310.00


    培养反应

    培养基的生长促进能力评估,是通过分析细胞的形态来定性,通过细胞计数并和对照培养基比较(至少三次传代)来定量。


    内毒素含量

    15EU/ml


    储存和效期

    1.  所有干粉培养基和制备好的液体培养基均在2-8保存。

    2.  不推荐制备浓缩培养基,因为游离碱性氨基酸和盐复合物溶解度低,可能在浓缩培养基中沉淀。

    3.  制备好的培养基的pH值和碳酸氢钠浓度是细胞生长的关键影响因素。它也受到培养基体积和培养器皿容量(表面体积比)的影响。例如,大瓶子如Roux瓶,pH值会随着大量二氧化碳释放而升高。因此,必须确定每种细胞类型的最佳培养条件,包括pH值,碳酸氢钠浓度,表面体积比。我们建议严格监控pH值。如果需要,可以使用无菌1N HCl1N NaOH调节pH值,或充入CO2

    4.  如果需要,可以在遵守无菌事项的前提下,在培养基过滤之前或之后添加补充剂。培养基的保质期将取决于添加到培养基中的补充剂的性质。

购买须知
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