支原体检测的核酸法，已广泛应用于细胞支原体筛查和生物制品企业的生产放行检测中。

但在使用PCR方法检测支原体之前，由于有些待检样品的成分过于复杂，或含有的某些成分会抑制PCR反应的进行，因此需要使用『支原体DNA提取试剂盒』提前做DNA的提取工作。

对于生物药或需遵循药典的样本，也由于样品基质可能会影响检测的灵敏度，因此需要样本做DNA抽提处理，实现核酸法最高的灵敏度。

这里向您推荐德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒

英文品名：

Venor®GeM Sample Preparation Kit

该试剂盒已经过多方广泛验证，有很多引用文献；

它已达到欧洲药典标准，可用于PCR或qPCR检测支原体的方法学验证。

1、产品信息：

2、产品特点

1）符合欧洲药典的要求。

2）采用离心管柱的方法，全程只需30分钟。

2）从细胞上清和生物制品中，均可分离支原体DNA。

3）洗脱DNA纯度高，体积50μl，保证PCR最大的灵敏度。

3、操作步骤

四步法：

1）细胞裂解

2）DNA吸附到核酸纯化柱上

3）去除残留污染物和抑制剂

4）DNA洗脱

试剂盒组分：

Spin columns（核酸纯化住）

Collection tubes（收集管）

Conditioner液

Binding Buffer液

Buffer A1液

Buffer A2液

Buffer E液

操作示意图：

4、所需其他材料及仪器：

＞96%无水乙醇

EP管（1.5ml或2ml）

离心机和恒温仪（用于1.5ml 或2ml 离心管）

移液器及带滤芯吸头（100μl 和1000μl）

可选：蛋白酶K（货号56-0002），用于处理富含蛋白（＞10mg/ml）的样品。

可选：DNA 内控对照，用于配合

Venor®GeM Classic Kit（货号11-1025）

或Venor®GeM qEP Kit（货号11-9025），

以保证操作过程没有问题。

5、注意事项：

1. 支原体DNA 提取试剂盒一次可从最多含有1X 106 细胞/ml 的细胞上清中直接分离DNA。

2. 富含蛋白的样本（蛋白含量＞10mg/ml）可能需要蛋白酶K 处理后，再抽提DNA。

3. 此试剂盒不适于提取真核细胞组织的DNA。

4. 若在提取DNA时加入了内控DNA对照，则在支原体核酸法检测时不需要再加内控对照。我们推荐使用对照，以验证结果的可靠性，也有助于排除故障。

5. 不要使用其他酒精来替代乙醇，它将导致核酸产量的下降。

6. 缓冲液E（Buffer E）的预热，会显著改善核酸的产量。

德国MB公司简介：

德国MB公司，全称Minerva Biolabs，是世界著名的微生物污染控制公司，成立于1999年，总部位于德国柏林。

公司创始人来自于全球闻名的罗伯特•科赫微生物研究所。

二十年来，MB公司专注于微生物污染检测与清除，

特别是支原体和军团菌的技术和产品，在世界上遥遥领先。

*   自1999年起即研发细胞培养和生物药工业用QC检测试剂

*   配备生物安全二级实验室

*   GMP级洁净车间生产

*   世界最大的支原体PCR检测试剂供应商

*   IOM和PDA成员

*   ISO 9001和ISO 13485认证

注：IOM全称Institute of Medicine

PDA全称Parenteral Drug Association

2007年，上海威正翔禹生物科技有限公司作为MB公司的全国总代理，将支原体检测防控的优秀产品引入中国。十几年来，不断为中国生物研究实验室，以及众多生物制药企业，提供了完整高效的支原体等微生物检测及祛除解决方案。

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(缔一生物)

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