400-166-8600
首页>技术资料>支原体检测祛除 > 支原体PCR验证用标准品,认准MB产品

支原体PCR验证用标准品,认准MB产品

来源:威正翔禹|缔一生物发布时间:2020-09-27阅读次数: 收藏

支原体PCR方法在国际上已得到欧洲、日本和美国药典的承认,它可以取代支原体经典药典方法(如培养法、DNA染色法),但前提是方法需要进行验证。在这方面,国内药典尚无明确说明,但相关权威机构在一些不同场合和法规指南中表示,将逐步与国际接轨,如果核酸法经过验证,保证其足够的灵敏度、特异性和耐用性,则也认可。


国内尚不能大规模推广核酸法主要有两个瓶颈:一是国内缺乏参比标准品。而且支原体最好是灭活的,级别至少有10CFU,如果再有100CFU则更好。二是企业仍需要用自己的样本基质进行PCR的方法学验证,这样增加了一定的难度。另外,支原体的DNA抽提也是一个必要的过程,难以统一化。


事实上,对支原体PCR或qPCR方法进行验证,除了可参考试剂盒生产厂家自身的验证外(尽管它不能完全替代用户自己的验证,但可提供特异性验证的一些信息,如使用哺乳动物细胞DNA、某些细菌菌属DNA等,而不必使用者自己再去尝试),用户自己主要是对方法的检测限和耐用性进行验证,这里最常用的就是10CFU支原体标准品。100CFU标准品可作为一个补充。


德国MB厂家集20多年支原体防控检测领域的经验,开发有一系列的相关产品,包括支原体核酸法验证用标准品。其10CFU标准品为灭活支原体冻干粉形式,经精确标定。所用支原体培养基符合欧洲医药管理局标准。支原体为灭活形式,不会带来污染,同时冻干粉又保证了产品的稳定性,不会受温度波动的影响。


每批支原体都会提供CFU与基因拷贝数的比值,以方便二者的换算。因为10CFU只能确定PCR能够达到的检测限在10CFU以下,但无法具体确定灵敏度的数值。带DNA拷贝数标定的基因组DNA标准品则可进一步确定检测限的数值。而且核酸法最终检测的对象是核酸,而产品的QC主要关注的是支原体,核酸的存在是侧面反映支原体存在的一个指标。CFU与基因拷贝数的比值很好地对二者进行了关联。


MB的支原体标准品批次均经厂家QC合格后方能出厂,包括其Ct值达到一定要求。另需注意的是,100CFU标准品不能按倍数稀释为10CFU标准品。因支原体在液相中不是均一分布,而大多呈集聚状态。因此按倍数稀释后,会造成支原体量上的偏差。


德国MB的支原体菌株来自英国菌种保藏中心(NCTC),均有ATCC编号。支原体传代次数少,发生突变几率低。而且经国际广泛引用和认可,部分如下:


如果您对MB的支原体标准品想订购或进一步了解,可联系中国区代理商上海威正翔禹生物公司或北京缔一生物公司。


(缔一生物)


本网站所有注明“来源:缔一生物”的文字、图片和音视频资料,版权均属于北京缔一生物网站所有。非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,否则将追究法律责任。取得书面授权转载时,须注明“来源:缔一生物”。


相关推荐
北京缔一生物科技有限公司 京ICP备19056719号 Designed by Wanhu