细胞焦亡既不属于坏死也不属于凋亡，而是一种独立的程序性细胞死亡方式。以下是对细胞焦亡、坏死和凋亡的详细比较：　　一、细胞焦亡　　定义：细胞焦亡(Pyroptosis)又称细胞炎性坏死，是一种程序性细胞死亡方式。它表现为细胞不断胀大直至细胞膜破裂，导致细胞内容物的释放，进而激活强烈的炎症反应。　　机制：细胞焦亡是由gasdermin介导的，依赖于炎性半胱天冬酶(主要是caspase-1、4...

RNase是核糖核酸酶（Ribonuclease）的简称，是一类能够水解RNA的蛋白质。以下是对RNase的详细解释：一、基本特性作用机制：RNase通过切断RNA分子中的磷酸二酯键，将RNA降解为单核苷酸或寡核苷酸。存在范围：这类酶广泛存在于真核生物、原核生物以及部分病毒中，是生物体内重要的核酸代谢酶之一。二、分类根据酶的作用机制和特性，RNase可以分为多种类型，如外切核糖核酸酶和内切核...

耐高温的DNA聚合酶是Taq酶，具体解释如下：一、定义与来源Taq酶，也被称为Taq DNA聚合酶，是从水生栖热菌Thermus Aquaticus（Taq）中分离出的一种具有热稳定性的DNA聚合酶。这种细菌最初是在美国黄石公园的一个热泉中被发现的。二、特性与应用特性：Taq酶能够耐受90℃以上的高温而不失活，这是其最显著的特点。在PCR循环中，包括变性（90°C左右）、退火（50°C左右）...

细胞培养基中支原体污染的危害是多方面的，以下是具体的危害分析：细胞生长受抑制：支原体污染会使细胞生长受到明显抑制，导致细胞增殖速度减慢，甚至停止。这直接影响了细胞培养的效率和产量。细胞病变：支原体感染会导致细胞发生病变，细胞可能出现变圆、从培养瓶壁脱落等现象。这些病变细胞不仅失去了正常的生理功能，还可能对周围的健康细胞产生负面影响。影响细胞代谢和功能：支原体污染会影响细胞的代谢途径和功能，导...

诱导多能干细胞（Induced Pluripotent Stem Cells，简称iPSC）是由已分化的体细胞转化而来。这些体细胞可以是来自成体组织的多种类型细胞，例如皮肤细胞、血细胞等。通过特定的基因重编程技术，将这些体细胞中的基因进行重编程，使其恢复到类似胚胎干细胞的多能性状态。这一过程通常涉及将几个关键的转录因子（如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）导入体细胞中，从而激活细胞内...

原代细胞容易污染的原因多种多样，主要包括以下几个方面：一、操作不当在原代细胞的分离、培养和传代过程中，操作人员的不洁净操作是导致污染的重要原因。例如，操作人员在打开培养瓶、移液等操作过程中，如果没有在酒精灯火焰附近进行或双手没有进行充分消毒，就可能将微生物带入细胞培养环境。此外，无菌技术不到位或实验室环境的污染也可能导致原代细胞被外源性污染物污染。二、培养物和试剂污染培养物和试剂中可能存在微...

在PCR（聚合酶链式反应）中，检测样品所需的微升数并不是一个固定的值，它取决于多种因素，包括PCR反应体系的总体积、样品的浓度、以及实验的具体要求等。以下是对这一问题的详细分析：一、PCR反应体系的总体积PCR反应体系的总体积通常在10~100微升之间，但具体数值可能因实验设计和仪器要求而有所不同。常见的PCR反应体系总体积包括10微升、20微升、50微升等。二、样品的浓度样品的浓度是影响P...

在生物学实验和细胞培养中，关于10%胎牛血清（FBS）的浓度描述，通常是指体积浓度。这意味着在配制细胞培养基时，胎牛血清占总体积的10%，而剩余的90%则是基础培养基。
  具体配制步骤如下（以配制100mL含有10%胎牛血清的培养基为例）：消毒操作：在无菌工作台下操作，确保所有用具和试剂都是无菌的，以防止细胞培养的污染。血清解冻：将胎牛血清提前解冻至适宜温度。基础培养基准备：量取90mL...

2024年10月，山东大学齐鲁医院妇产科生殖医学中心；山东大学临沂市人民医院生殖医学科 (Center for Reproductive Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology, Qilu Hospital of Shandong University, 107 Wenhua West Road, Ji’nan, Shandong ...

2024年10月，呼和浩特**医院医学检验科；内蒙古农业大学生命科学学院；内蒙古自治区人民医院神经内科 (Department of Medical Laboratory, Huhhot First Hospital, Hohhot, Inner Mongolia 010020, China b College of Life Sciences, Inner Mongolia Agricul...

细胞代谢产物是细胞正常生理活动的必然产物，在细胞培养过程中，某些代谢产物的积累可能会影响培养液的外观和细胞的状态，甚至导致白色絮状物的出现。蛋白质沉淀：细胞在代谢过程中会产生大量的蛋白质，当培养液中的蛋白质浓度过高时，可能会发生沉淀。这种沉淀通常是絮状或颗粒状，不溶于培养基。例如，在冻存细胞复苏后，DMSO和血清混合后在低温下容易导致蛋白质变性沉淀。磷酸钙沉淀：血清中含有磷酸钙，在特定条件下...

如果血清被污染了，处理的方法会因污染的类型和程度而有所不同。以下是一些常见的处理步骤和建议：一、识别污染类型首先，需要确定血清被何种类型的污染物污染。常见的污染物包括细菌、真菌、支原体、病毒以及化学物质等。通过观察血清的外观、气味以及进行微生物培养等实验，可以初步判断污染的类型。二、处理不同类型的污染细菌污染：如果污染较轻，可以尝试更换抗生素的种类，并加大抗生素的用量，以抑制细菌的生长。如果...

在聚合酶链式反应（PCR）这一分子生物学领域的核心技术中，退火温度扮演着至关重要的角色。它不仅是决定PCR反应特异性的关键因素，还直接影响扩增效率，进而影响最终的实验结果。本文旨在深入探讨退火温度对PCR反应的影响，以及如何通过优化退火温度来提高PCR实验的准确性和可靠性。一、退火温度：PCR反应中的“黄金分割点”退火，作为PCR循环中的关键步骤，是指引物与模板DNA在特定温度下特异性结合的...

在分子生物学研究中，聚合酶链式反应（PCR）是一种不可或缺的技术，它能够在体外快速、特异地扩增特定的DNA片段。然而，PCR的成功与否在很大程度上取决于一系列精细的实验条件，其中退火温度的设定尤为关键。本文将深入探讨退火温度的原理、实验方法及其在PCR扩增中的重要性，旨在为科研人员提供实用的指导和策略。一、退火温度：PCR扩增的“温度计”退火温度，即PCR循环中引物与模板DNA结合的温度，是...

聚合酶链式反应（PCR）作为分子生物学领域的核心技术，其成功实施离不开一系列酶制剂的精确作用。这些酶制剂在DNA的复制、修复及扩增过程中扮演着重要的角色，它们不仅决定了PCR实验的效率和准确性，还直接影响了实验结果的可靠性和可重复性。本文将深入探讨PCR实验中常用的酶制剂，解析它们的功能及其在实验中的具体应用。一、DNA聚合酶：PCR反应的“发动机”DNA聚合酶是PCR实验中最核心的酶制剂，...

聚合酶链式反应（PCR）是一种高度敏感且强大的分子生物学技术，广泛应用于科研、医学诊断及法医学等领域。然而，尽管其技术成熟且应用广泛，PCR实验却极易受到各种形式的污染，尤其是核酸污染，这种污染往往会导致实验失败。本文将深入探讨核酸污染如何影响PCR实验，并阐述其导致实验失败的具体机制。核酸污染的定义与来源核酸污染是指在进行核酸检测时，样本或检测试剂受到其他核酸的污染，这些污染物可能来自实验...

近日，德国维尔茨堡大学生物中心生物技术与生物物理学系的研究人员在Science期刊上发表了一篇具有重要意义的论文，这项工作由欧洲研究委员会、德国联邦教育和研究部以及德国研究基金会资助。该研究聚焦于治疗性单克隆抗体（mAbs）与CD20分子之间的相互作用机制。这项研究不仅为理解mAbs如何激活免疫系统以杀死B细胞提供了关键的分子层面见解，还可能对改进现有mAbs药物的设计和开发产生深远影响。背...

RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）和qPCR（实时荧光定量聚合酶链式反应）是两种基于聚合酶链反应（PCR）技术的核酸扩增方法，它们在应用、原理和特点上存在显著区别。以下是两者的详细对比：

  一、应用范围RT-PCR：主要用于定性分析，即检测目标基因的存在与否。常用于检测RNA的表达水平，例如检测基因的转录水平、mRNA的表达等。也广泛应用于基因转录水平分析、miRNA表达研究以及病毒...

‌PCR扩增‌（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应）是一种在体外扩增特定DNA片段的技术。其基本过程包括三个主要步骤：变性、退火和延伸，这三个步骤在一个循环中重复多次，从而实现DNA的指数级扩增。 变性温度：通常将反应体系加热至 94-98°C。目的：高温使双链 DNA 的氢键断裂，两条链解开成为单链，以便引物能够与模板链结合。时间：一般持续 15-30 秒，...

实时定量聚合酶链式反应（Real - time PCR），也称为实时荧光定量 PCR，是一种在 PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。基因表达定量分析基础研究方面：在分子生物学基础研究中，用于研究基因在不同细胞类型、发育阶段以及不同环境刺激下的表达变化。例如，在胚胎发育研究中，可以利用 Real - time...

光线作为一种重要的环境因素，对细胞培养过程有着复杂而多样的影响。在细胞培养实验中，了解并控制光线条件，对于维持细胞的正常生长、繁殖以及保证实验结果的准确性和可靠性至关重要。一、光线对培养基成分的影响光线会直接作用于细胞培养基中的某些成分，特别是B族维生素（如B2、B12）和芳香族氨基酸（如色氨酸、酪氨酸）。这些成分在光照条件下会发生光化学转化和光降解，导致培养基的性状、性能及储存有效期发生改...

荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，qPCR）是一种在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。以下是荧光定量PCR的原理和步骤的详细解释：一、荧光定量PCR原理荧光定量PCR的基本原理是利用DNA聚合酶在PCR过程中合成新DNA链的特性，结合一种荧光标记的探针或染料，通过实...

Taq DNA聚合酶的**反应温度主要与其催化活性有关。以下是对Taq DNA聚合酶**反应温度的详细分析：一、最适催化温度Taq DNA聚合酶在催化DNA合成时，有一个较高的最适温度范围，通常为7580℃。在这个温度范围内，Taq DNA聚合酶的催化活性最高，延伸速率达到峰值。实验证明，在最适温度下，Taq DNA聚合酶的dNTP掺入速度非常快，可以达到35100 nt/(s·酶分子)，最...

细胞冻存与复苏是一种用于长期储存细胞的技术，其原理和过程分别如下：细胞冻存的原理细胞冻存是指将细胞保存在超低温环境中，暂时停止细胞的代谢活动，使细胞进入“冬眠”状态的一项技术。一般细胞冻存遵循“慢冻”原则，这是因为在降温过程中，细胞器会脱水，细胞内可溶性物质浓度增加，并形成冰晶。缓慢冷冻的过程可以逐渐使细胞脱水，以防止细胞内形成大冰晶，因为大冰晶可能导致细胞膜和细胞器的损伤和破裂。同时，常使...

PCR技术（聚合酶链式反应）需要两种引物的原因主要基于其扩增DNA片段的机制和原理。以下是详细解释：一、PCR技术的基本原理PCR技术是一种在体外酶促扩增特定DNA片段的技术，类似于DNA的天然复制过程。它以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5′端和3′端互补的寡核苷酸为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸至完成新的DNA合成。其主要过程由变性、退火和延伸...