如何检测细胞是否有支原体污染？

细胞培养中有高达80%的概率被支原体污染，其中大部分是由于操作者的不规范没有佩戴口罩，造成的口腔支原体污染。所以支原体检测是很有必要的，如果是用作方法验证，可采用支原体灵敏度标准品来检测支原体。

支原体污染初期, 在高倍显微镜下（400倍），虽然细胞无明显变化，但是在细胞膜周围或细胞间隙可以发现细小黑色颗粒。细胞培养时间延长, 尽管培养液不浑浊（一般细菌污染培养液会变浑浊）, 但培养液pH值变化明显然后颜色变黄（虽然一般的细胞培养培养基也会变黄，但是速度要慢很多）。

在支原体感染较重的时候可以引起细胞变形。
如果你们实验室没有常规杀除支原体的操作，那么我相信只要你们在用细胞培养标本去送RNA-seq、LncRNA测序、CirRNA测序时，公司给出的结果都会有支原体污染。

PCR扩增法

这种方法是目前最常用的方法，可以用琼脂糖凝胶电泳检测和荧光定量检测，检测原理都是在支原体16S rRNA基因的保守区设计引物，通过检测支原体基因组的方法来检测细胞中有无支原体的污染。如果有支原体的存在，则在琼脂糖凝胶电泳或者荧光定量扩增时，就可以检测到。

北京缔一生物科技有限公司 国内总代理的德国MB 产品

100CFU支原体灵敏度标准品

支原体灵敏度标准品（方法验证用）

欧洲药典和日本药典要求，如果用PCR法替代培养法检测支原体时，此PCR检测的灵敏度需达到10CFU/ml。如替代DNA染色法，其灵敏度需达到100CFU/ml

德国MB公司提供系列的支原体灵敏度标准品（灭活支原体），用于核酸扩增法（qPCR/PCR法）检测支原体的方法学验证。

产品特点

（1）来自英国菌种保藏中心NCTC，是灭活支原体；

（2）传代次数少，支原体无变异；

（3）产品为冻干粉，保证其稳定性；

（4）分析证书（COA）提供该批次GU：CFU比值（支原体基因组/菌落数比值）；

（5）支原体已灭活，保障细胞实验室安全。

北京缔一生物科技有限公司国内总代Ausbian品牌,德国Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。细胞培养实验使用的Ausbian澳洲进口特级胎牛血清,新生牛血清，干细胞培养基,马血清，德国MB支原体检测/祛除试剂盒,DNA污染祛除试剂,支原体PCR/qPCR定量试盒等产品。欢迎访问缔一生物官网：www.dyshengwu.com。联系电话:4006661688。