细胞培养过程中怀疑被支原体污染怎么办?

细胞培养过程被支原体污染怎么办?

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发表时间:2024-02-05 16:26

如果细胞培养怀疑被支原体污染,可以采取以下措施进行处理:

确认支原体污染:可以通过支原体PCR检测试剂盒对支原体DNA进行检测,确认是否存在支原体污染。

清除支原体:如果确认存在支原体污染,可以采用清洗纯化法清除支原体。具体方法包括细胞营养驯化、优质细胞群的筛选、细胞清洗、反复离心洗涤等步骤。

限制使用的要求:若无法避免使用可能受到支原体污染的细胞系,可以采用限制使用的方式,**程度减少污染的范围和影响。这可以通过降低细胞传代次数来实现,细胞传代次数越少,支原体的繁殖和扩散机会就越少。

加强设备管理:使用过的培养瓶、培养液和细胞等应立即丢弃,并进行消毒处理。细胞房环境要做全面的消杀,以及人员手部等防止二次污染!

防止交叉污染:在细胞培养过程中,必须严格遵守无菌操作规程,避免交叉污染。无菌操作包括但不限于穿戴专门的工作服和鞋子,对所有实验器具进行消毒,以及在实验前后对实验室进行彻底的清洁和消毒。

其他方法:如紫外线照射、高温灭菌、添加抗生素等也可以有效地消除支原体污染。但是,这些方法都有一定的局限性,需要根据具体情况进行选择和应用。

总之,如果怀疑细胞培养被支原体污染,应采取一系列措施进行处理,包括确认污染、清除支原体、限制使用、加强设备管理和防止交叉污染等。同时,也应采取其他方法进行预防和治疗。

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支原体荧光定量PCR (gPCR) : 是在常规 PCR 基础上,将 [针对支原体特异性保守序列的探针,做荧光标记,使 PCR 扩增后的产物带有荧光,利用荧光信号的变化和配套软件,进行 DNA 扩增反应的实时监测,简称gPCR

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