细胞污染清除剂可以清除黑胶虫吗

细胞污染是细胞培养中常见的问题，在发现细胞形态异常时，一定要及时排查污染。在各种细胞污染类型中，最为大家困扰的污染就是“黑点”可能的污染类型：支原体污染和“黑胶虫”污染。那细胞污染细胞污染清除剂可以清除支原体污染吗？

支原体污染几乎可影响所有细胞生长参数、代谢及研究的任一数据，并且，支原体缺乏细胞壁，所以常规的抗生素并不能对它们起到抵抗作用，而且由于其直径太小，滤菌器也无法过滤。

黑胶虫在细胞培养中是一种可能存在的污染，其具体的分类和性质在学术界并没有明确的定论。一些研究认为黑胶虫可能是一种微生物污染，而另一些研究则持不同观点。

缔一生物提供的德国Minerva Biolabs公司生产的细胞污染清除剂为支原体清除试剂系列：Zell Shield、Mynox、Mynox Gold，可高效清除支原体污染。

对于费力扩增的细胞（如已转染，或经过体外刺激），如果细胞中发现有支原体污染，但此细胞又不愿丢弃，希望继续培养，推荐使用MB公司生产的复合抗生素Zell Shield。

（1）在每次使用Zell Shield®之前，细胞传代时，先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法”处理好细胞，再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞，能达到更好的祛除支原体的效果。

（2）Zell Shield®常规为-18℃保存，建议使用前，先融化分装，仍旧-18℃避光保存，使用时按需融化配制。避免反复冻融。

（3）Zell Shield®按1:100浓度可直接加入培养基。例如：500ml培养基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培养基使用。

若是无法长期培养的珍贵样本或病毒收获液，则推荐使用德国MB公司的Mynox® ，处理3小时，直接杀除。

（1）将200μLMynox治疗液于2.8ml培养液（FBS浓度未5%）混合，加入10^4-10^5个细胞。孵育2-3小时。

（2）终止治疗，为细胞换液。

（3）使用原有正常培养液，传代3-4次（FBS恢复至原有浓度）。

（4）取样，PCR检测，鉴定支原体是否清除彻底。

非常珍贵的细胞或不易获得的生物样本，被支原体污染了，但需要挽救，不能丢弃，例如：珍稀的细胞种子。可采用支原体彻底清除法。若是可以培养超过一个月的细胞，则推荐使用德国MB公司的Mynox® Gold，直接杀除+巩固防护两步处理。

（1）将500μL初次治疗液与含5%FBS的4.5ml培养液，于离心管中混合均匀。

（2）将配制好的治疗液培养基转移至培养瓶或培养皿中。

（3）加入10^4-10^5个细胞。

（4）培养细胞至80%-90%汇合度。

（5）细胞传代，将需要传代的细胞、巩固治疗液、9.5ml原有培养基混合均匀后，转移至培养瓶或者培养皿中。

（6）重复（4）（5）2次后，再次传代，不添加Mynox Gold。

（7）取样，PCR检测，鉴定支原体是否清除彻底。