支原体检测试剂盒一步法——德国MB Venor®GeM OneStep操作步骤

缔一生物提供的支原体检测试剂盒一步法为PCR法，来自德国Minerva-Biolabs原装进口，缔一生物国内总代理德国MB产品。该试剂盒是一种通过常规PCR直接检测细胞培养物、细胞培养基和其他生物基质中支原体污染的试剂盒。

支原体检测试剂盒PCR一步法为旨在要求最少的移液，包括PCR所需的所有试剂:引物，核苷酸，聚合酶和内部扩增控制，提供即用型冻干反应混合物。用所含缓冲液复溶后，根据样品数量将混合物分配到反应管中。在PCR前只需要加入样品或对照。

支原体检测试剂盒PCR法（一步法）操作步骤

下列图示以Venor® Gem OneStep
支原体
常规PCR
检测试剂盒
(一步法)( 货号：11-8050)   为例，具体产品操作以说明书为准。

第1步：样本处理

第2步：试剂制备

第3步：PCR体系建立

第4步：启动PCR反应

第5步：电泳结果分析

191bp为内控对照条带，表明PCR反应正常。

当样本存在支原体污染时，由于内控对照与支原体DNA存在竞争，内控对照条带变弱（例如支原体DNA＞10^3拷贝）。

阳性对照中支原体DNA＞10^4拷贝，内控对照条带会完全消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带，此条带不影响检测结果。

如果待测样本对PCR产生抑制，则内控对照条带变弱（和阴性对照相比），此时应先进行DNA抽提（推荐使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒），然后再检测。

储存条件

2~8℃至少12个月。复溶后必须在-18℃保存。