FBS胎牛血清之细胞种类选择及使用避雷事项

胎牛血清细胞种类选择及使用避雷事项

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发表时间:2024-07-10 15:54

胎牛血清‌FBS细胞培养中常用的营养补充剂,其种类和质量对细胞生长和实验结果有重要影响。选择合适的胎牛血清种类和使用正确的操作方法,可以显著提高细胞培养的成功率和实验结果的准确性。以下是一些关于胎牛血清的种类及使用避雷事项的概述:

细胞种类选择:

对于原代或是正常细胞株,生长条件要求高的细胞和干细胞建议使用Ausbian特级胎牛血清(内毒素含量<3EU/ml)

由于血清有批间差异,细胞种类不同,建议购买前申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求进行批量囤货,以保证所需血清质量的一致性。

使用避雷事项:

储存条件:应储存在-20℃的冰箱中,避免反复冻融。不建议在4℃冰箱长期保存血清,因为这可能导致血清中的各种蛋白和脂蛋白聚集而形成沉淀或可见的混浊23

解冻方法:建议采用梯度溶解法,将血清从-20℃冰箱取出后,2-8℃解冻过夜,并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。避免将血清直接从-20℃放入室温或37℃的水中解冻,以免因温差过大造成沉淀。

处理沉淀物:解冻后的血清可能会出现絮状沉淀物,这些一般是由血清中纤维蛋白及脂蛋白变性所造成,不影响使用。去除这些絮状沉淀物可以通过3500rpm离心5分钟去除,但不宜过滤去除,因为絮状物可能阻塞滤膜。

热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,以使补体去活化。这在免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞、平滑肌细胞时推荐使用。加热可以灭活补体系统,避免激活的补体参与溶解细胞事件等。

分装冻存:少量使用时建议分装冻存,因为血清结冰时体积会增加约10%因此在分装血清时须预留一定体积,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。

正确选择和使用胎牛血清对于细胞培养实验的成功至关重要。通过遵循上述指南,可以避免常见错误,确保实验结果的准确性和可重复性。

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