花一样的钱,如何挑好的胎牛血清?如何挑好的胎牛血清? 二维码
发表时间:2024-07-25 15:18 细胞实验室的老师都知道,血清的质量对细胞生长至关重要。但是刚进入实验室的同学可能不太了解,今天跟大家分享就是如何花一样的钱,挑选好的胎牛血清。 血清在细胞培养中起到如下作用: 1. 提供细胞生长代谢所需的生长因子、激素等活性成分和各种营养物质; 2. 提供结合蛋白,通过结合维生素、脂质、微量元素和激素等成分,调节这些成分的释放与活性; 3. 解毒和抗氧化功能; 4. 提供细胞贴壁所需的细胞外基质成分; 5. 缓冲细胞培养基的酸碱度。
动物血清包括:胎牛血清、新生牛血清、猪血清、马血清等。其中胎牛血清最为常用。 胎牛血清(简称 FBS):采自怀孕 5-8 个月母牛中的胎牛。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有各种促进生长发育的因子,适合各种细胞生长,特别是干细胞,神经细胞,或需要转染、融合的细胞。 新生牛血清(简称:NCS):采自出生一天至一周内的新生牛。 (注意,牛胚胎到了孕晚期,各脏器逐渐发育完全,很多促进细胞生长发育的重要因子会自动消失。因此孕晚期的胎牛一直到出生后的新生牛、小牛,血清中因子会少了许多,成分和胎牛血清有很大的不同。) 胎牛血清和新生牛血清,成分、适用范围均不相同,通常新生牛血清的价格会便宜很多。 所以就要看你养的细胞是哪种细胞,比如:干细胞,神经细胞,或需要转染、融合的细胞、免疫细胞等,这种就需要用到胎牛血清。选对了血清,就是省钱。
选对血清类型,下一步就要挑生产质量好的买,才能养好细胞。 血清的质控是否合格,首先要要看《检测报告》。不但细菌、真菌、支原体、病毒的检测必须为阴性,而且《检测报告》中的内毒素(Endotoxin)的多少,是未来保证细胞不会发生「慢性中毒」的一个重要指标。内毒素要小于 10EU/ml,**小于 3EU/ml,而且越低越好。 内毒素:是革兰氏阴性菌的细胞壁成分。它的毒性可以直接参与细胞凋亡。内毒素含量高,容易导致细胞「亚健康」,造成数据不准,甚至老化、死亡,试验失败。 因此,《检测报告》中内毒素的值越低越好。 世界细胞培养学会,依据内毒素对血清进行分级,内毒素含量越低的血清,级别就越高 以胎牛血清为例: 当血清中内毒素含量≤ 10EU/ml 时,此血清为特级胎牛血清; 当血清中内毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml 时,此血清为优级胎牛血清; 当血清中内毒素含量≥ 25EU/ml 时,此血清为标准级胎牛血清; 目前,由于同一厂家不同批次的血清,内毒素数值也可能有较大差异,因此很多血清厂家在名称上已不注明级别。但使用者仍可通过《检测报告》,自行甄别挑选。 注意:内毒素对细胞的影响,很多时候通过短期的试用是看不出来的。 因此,选择好血清的正确动作:先看《检测报告》,内毒素等指标优质,再开始试用。 血清出厂前的质控,还包括理化性质的检查(如外观、pH 值、渗透压)以及促细胞生长能力检查等。这些都是细胞培养效果的重要保证。
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