保存在负80的胎牛血清如何解冻

对于保存在-80℃的胎牛血清，解冻时需要遵循一定的步骤以确保其质量不受损。以下是一个推荐的解冻方法：

三步法（梯度解冻法）

预解冻：

将血清从-80℃冰箱中取出，先转移至-20℃冰箱中放置至少24小时，这一步是为了减小温差，避免直接升温导致的血清成分失活。

部分解冻：

将血清从-20℃冰箱中取出，然后置于28℃冰箱中放置1224小时，使其部分融解。

完全解冻：

将血清从28℃冰箱中取出，置于室温（1625℃）下，让其全部融解。在融解过程中，需要规则地轻柔混匀血清，但应避免产生泡沫。同时，可以轻微摇晃血清瓶，以避免血清中的蛋白物质凝聚产生絮状物。

注意事项

避免温差过大：

切勿直接将血清从-80℃转移至室温或进行37℃、56℃温水浴解冻，以免温差过大导致血清产生沉淀，影响品质。

处理絮状物：

如果在解冻过程中血清析出絮状物，这通常是血清中的纤维蛋白，属于正常现象，对后续培养无害，无需去除。但如果需要去除，可以采用400g/1~2分钟离心的方法，或将沉淀自然沉淀在瓶子底部后，小心地将血清转移至无菌瓶中。不建议采用过滤方式去除。

及时使用或储存：

解冻后的血清如果一次无法用完，应将其分装在无菌、无热原的容器内密封冷冻储存。已开封或分装后的血清，建议当即配制使用或密封冷冻储存，以避免长时间冷藏或常温下放置导致噬菌体产生。

无菌操作：

在进行血清分装时，应穿实验服、佩戴一次性手套，并严格遵守无菌操作流程，以防止细菌污染。

遵循上述步骤和注意事项，可以确保保存在-80℃的胎牛血清在解冻过程中保持其品质，为后续的细胞培养实验提供稳定的支持。