细胞房支原体污染怎么快速解决?

怎么快速解决细胞房支原体污染

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发表时间:2024-11-22 15:28

细胞房支原体污染是一个需要迅速解决的问题,以下是一些快速解决细胞房支原体污染的方法:

一、确认污染并终止试验

观察细胞形态:支原体污染可能导致细胞形态改变,如细胞形状不规则、细胞大小不一等。通过观察细胞形态,可以初步判断是否存在支原体污染。

检测支原体:采用PCR检测、酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光抗体法或特异性抗体检测等方法,确认细胞培养物中是否存在支原体污染。

终止试验:一旦发现支原体污染,应立即终止相关试验,避免污染扩散。

二、消除污染

丢弃受污染细胞:将受污染的细胞和培养基、耗材等全部丢弃,防止污染扩散。

清洗和消毒:

使用70%乙醇或其他消毒剂对实验室设备、器皿等进行全面清洗和消毒。

特别注意清洗和消毒与受污染细胞接触过的设备,如离心机、培养箱等。可使用Mycoplasma off™支原体祛除喷雾剂就很好用,可以喷于试验台、超净台、培养箱、液氮罐、移液器、门把手、电话等设备表面。

使用抗生素:在细胞培养过程中,可以添加对支原体敏感的抗生素,如环丙沙星、多西环素、庆大霉素、卡那霉素等,以消除支原体污染。但需要在专业人员的指导下进行,并注意抗生素的浓度和作用时间。

使用支原体清除剂:可使用直接加入培养基使用的Zell Shield®细胞支原体去除剂,Zell Shield®为无菌溶液,无细胞毒性,采用复合支原体敏感抗生素,对大多数细胞株无毒。Zell Shield®通过阻止支原体、真菌、霉菌、致命病菌增殖过程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。   

三、防止再次污染

严格无菌操作:在进行细胞培养时,应严格遵守无菌操作规程,如使用无菌手套、无菌培养皿等。

使用无菌培养基和器材:确保使用的培养基和器材经过无菌处理,且未受到支原体污染。

定期检测:定期对细胞培养物进行支原体检测,及时发现并处理污染。

建立污染检测系统:建立完整的污染检测系统,记录每次检测的结果,以便及时发现和解决问题。

四、其他措施

加热灭活法:将细胞培养物放入50℃水浴中加热30分钟或60℃水浴中加热15分钟,可以杀死支原体。但需要注意温度不能过高,以免对细胞造成损伤。

使用特殊培养基:使用能够抑制支原体生长和繁殖的特殊培养基进行细胞培养。

UV灭菌:将细胞培养物放置在UV灯下照射一定时间,可以有效地消除支原体污染。但需要注意UV灯的照射强度和时间,以避免对细胞造成损伤。

综上所述,解决细胞房支原体污染需要采取多种措施,包括确认污染并终止试验、消除污染、防止再次污染以及其他措施等。只有全面、细致地执行这些步骤,才能有效地解决细胞房支原体污染问题。

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