PCR Clean™祛除RNA的效果检测

德国Minerva Biolabs公司提供的PCR Clean™是针对实验室常用的核酸污染祛除试剂，在常见的仪器、物品的污染祛除效果进行了检测，并对其结果进行了详细的阐释。

使用德国MB公司的ExtractNow™RNA提取试剂盒从人细胞中提取RNA。测量RNA浓度，并在plexglass®表面的6个不同点上各移液5µg（11µl）。

RNA完全风干，然后分别使用含有PCR Clean™、稀释的洗洁精、70%乙醇、异丙醇、水或干纸巾的纸巾，通过擦拭污渍，将RNA移液。

用湿润的棉签擦拭同一区域收集样本。

携带所收集的RNA样本的拭子转移到400µl裂解缓冲液中，使用ExtractNow™RNA提取试剂盒提取RNA。作为阳性对照，将人细胞中提取的5µg RNA直接转移到400µl裂解缓冲液中，并以与其余样品相同的方式处理。对包括阳性对照在内的所有RNA样本进行逆转录，然后对合成的cDNA样本进行qPCR。

结果显示，与其他清洗剂和阳性对照相比，PCR Clean™从plexglass®表面祛除RNA后，RNA的损耗更大（表3）。这也可以在图3中显示，其中cDNA扩增的ct值，由RNA通过逆转录合成，与其他清洗剂祛除RNA后的ct值和阳性对照相比，PCR Clean™祛除RNA后的ct值更高，表明RNA量的减少幅度更大。

表3.使用PCR Clean™从plexglass®表面祛除RNA后，通过逆转录从RNA合成cDNA的qPCR扩增测量ct值，并与不同清洗剂进行比较。

图3所示。用不同的清洗剂从plexglass®中祛除RNA后，通过逆转录由RNA合成的cDNA的qPCR扩增曲线（详情见上图）。