胎牛血清透析之后可用于什么实验? 二维码
发表时间:2025-01-14 16:19 胎牛血清是从采自5~8月龄牛胚胎的血液中分离得到的血清,营养丰富,含有三四百种不同成分,这些成分对于细胞生长至关重要。胎牛血清常用于细胞培养,能够为细胞提供必要的生长条件和支持细胞增殖。然而,在某些特定的细胞实验中,普通胎牛血清可能无法满足实验需求,因此需要使用透析胎牛血清。透析胎牛血清是在普通胎牛血清的基础上,通过透析处理去除分子量在1万以下的小分子物质(如葡萄糖、盐、氨基酸、激素等)而得到的。这一处理过程使得透析胎牛血清在保留大分子营养成分的同时,降低了小分子物质的含量,从而减少了这些物质对细胞培养的干扰。透析胎牛血清因其特殊的处理工艺和性质,在多种细胞实验中扮演着不可或缺的角色,具体可用于以下实验: 同位素标记实验:同位素标记技术,例如Stable isotope labeling with amino acids in cell culture(SILAC),是一种基于质谱的蛋白质组学技术。它通过将13C或15N标记的氨基酸引入培养基,标记细胞内新合成的蛋白质,用于比较不同处理下的细胞蛋白质丰度。透析胎牛血清可用于排除天然氨基酸的干扰,以确保标记氨基酸的准确性。 工程细胞株的筛选:例如,CHO-DFGRˉ细胞株需要在培养基中添加次黄嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸才能生存。透析胎牛血清可用作选择培养基的一部分,以帮助筛选经过基因工程的细胞株。 细胞代谢和信号通路研究:在研究细胞代谢过程或信号通路时,使用透析胎牛血清可以排除无关小分子的影响,为研究细胞对特定物质的反应提供更精准的环境。例如,在研究呼吸道合胞病毒的宿主特异性时,科研人员利用透析胎牛血清为细胞创造一个无外源氨基酸干扰的环境,从而成功观察到了病毒对宿主细胞的侵袭过程。 药物筛选实验:透析胎牛血清也能为细胞提供一个更加稳定、无干扰的生长环境,从而提高药物筛选的准确性和重复性。例如,有人要从化合物库中筛选SIP4受体的拮抗剂,以抑制流感病毒带来的免疫激活导致的肺损伤,采用报告基因进行监测,为了避免细胞培养环境中存在的小分子的干扰,需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培养基来培养细胞。类似在药物研发过程中,采用特定启动子操纵的荧光素酶报告基因,基于细胞平台的高通量药物筛选,也都需要无外源小分子的培养体系,因而也要用透析胎牛血清。 细胞克隆筛选:杂交瘤细胞和CHO细胞等,在进行细胞筛选时,需要无外源小分子如次黄嘌呤和胸腺嘧啶等的干扰,因此也需要用到透析胎牛血清。 综上所述,透析胎牛血清在细胞实验中具有广泛的应用价值,特别是在需要精确控制实验条件的实验中更是不可或缺。 上一篇细胞污染了能修复回来吗
文章分类:
胎牛血清/细胞培养
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