干货分享:胎牛血清中的外泌体怎么去除

胎牛血清中的外泌体怎么去除

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发表时间:2025-01-17 16:47

胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)是细胞培养实验中最常使用的试剂,为细胞生长提供丰富的营养物质。然而,在外泌体研究中,胎牛血清中大量的牛源外泌体会对实验分析造成极大的干扰。因此,在进行外泌体研究时,需要去除胎牛血清中的外泌体。以下介绍几种去除胎牛血清中外泌体的方法:   

一、超速离心法

基于超高速离心机去除FBS中的外泌体。有些操作建议为120,000g,18小时,4℃。但需要注意的是,超速离心法的外泌体去除效果并不理想。有研究显示,使用超速离心法处理的去外泌体血清(UC-dFBS)的外泌体去除率仅为88%,颗粒残留量高出超滤处理方式和商品化去外泌体血清1~2倍。

二、超滤法

以超滤的方式去除FBS中的外泌体。例如,将常规FBS在Amicon ultra-15离心过滤器中以3,000g离心55分钟。这种方法可以达到较高的外泌体去除率,有研究显示,使用超滤处理方式的去外泌体血清(UF-dFBS)的外泌体去除率可以达到96%。

三、使用商品化去外泌体血清

目前市面上已有若干品牌的商品化去外泌体血清销售,如SBI无外泌体胎牛血清等。这些血清通过先进的技术去除其中的外泌体成分,同时保留了传统FBS中的营养成分和生长因子,为细胞培养提供了更加纯净的环境。使用方法和常规胎牛血清一致,无需做额外处理。

四、过滤法

使用特定的过滤装置或技术去除胎牛血清中的外泌体。例如,有的去外泌体血清产品是由无菌采集的健康胎牛血清通过过滤法去除外泌体而成,去除率可达97%或98%以上。这种方法不仅有效去除了外泌体,还保留了FBS中重要的细胞营养因子,对细胞生长速率和形态无影响。

注意事项

在选择去除方法时,需要考虑外泌体的去除效率以及对细胞生长的影响。

处理后的血清应进行严格的质量控制,确保无外泌体残留且对细胞生长无负面影响。

储存和处理过程中应注意无菌操作,避免污染。

综上所述,去除胎牛血清中的外泌体有多种方法可选,包括超速离心法、超滤法、使用商品化去外泌体血清以及过滤法等。在实际应用中,应根据实验需求和条件选择合适的方法。



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