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常规PCR Kit (经典法)(不含Taq酶)

 
英文: Venor® Gem Classic
货号: 11-1025
品牌: Minerva-Biolabs®
规格: 25次/盒
用途: 用于【细胞和生物制品】及其生产过程中【支原体】污染的检测
价格:
****
产品详情
产品说明书
应用文章

常规PCR Kit (经典法)(不含Taq酶)

Venor® Gem Classic


品名

货号

规格

价格

常规PCR Kit (经典法)(不含Taq酶)

Venor® Gem Classic

11-1025

25次/盒

询价

11-1050

50次/盒

询价

11-1100

100次/盒

询价

11-1250

250次/盒

询价


常规PCR检测试剂盒经典法特点

1.内控对照为独立包装,遵循欧洲药典和日本药典操作流程。

2.高特异性,仅一条阳性对照条带,即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单,易于观察。

3.高灵敏度,若PCR反应体系加入10μl样本,支原体检测限度为≤5或≤10CFU(详见下文“Venor® Gem Classic Kit 10种常见支原体检测限”)。

4.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体,与细胞和真核DNA无交叉反应。

5.试剂盒中不含Taq酶,可另外购买。推荐使用德国MB公司专用Taq酶。(货号: 53-1050)

常规PCR检测试剂盒经典法

Venor® Gem Classic Kit

10种常见支原体检测限


物种

检测限[CFU/ml]

物种

检测[CFU/ml]

莱氏无胆甾原体

5

肺炎支原体

10

猪鼻支原体

10

精氨酸支原体

10

发酵支原体

10

鸡败血支原体

10

口腔支原体

10

螺原体

10

关节液支原体

10

唾液支原体

10

视频:支原体PCR检测对病毒性疫苗研发起到什么作用 - 缔一生物 (dyshengwu.com)


常规PCR检测试剂盒经典法操作步骤

1步:样本处理

a.细胞培养上清

b.生物药或需遵循药典的样本

说明:①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。

    ②细胞培养物样本含丰富的DNA酶,在低温下也能降解支原DNA,影响检测灵敏度。

建议:样本做DNA抽提处理,实现最高灵敏度。

推荐:德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒,Venor® Gem Sample Preparation Kit。该DNA抽提试剂盒已经过广泛验证。

2步:试剂制备

3步:PCR体系建立

a.细胞培养上清

b.生物药或需遵循药典的样本

4步:启动PCR反应

5步:电泳结果分析

191bp为内控对照条带,表明PCR反应正常。当样本存在支原体污染时,由于内控对照与支原体DNA存在竞争,内控对照条带变弱(例如支原体DNA>10^3拷贝)。阳性对照中支原体DNA>10^4拷贝,内控对照条带会完全消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带,此条带不影响检测结果。

如果待测样本对PCR产生抑制,则内控对照条带变弱(和阴性对照相比),此时应先进行DNA抽提(推荐使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒,详见第25页),然后再检测。



储存条件

2~8℃至少6个月。复溶后在-18℃保存。

效期

1年6个月

(缔一生物)

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