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常规PCR Kit (一步法)

 
英文: Venor®Gem OneStep
货号: 11-8025
品牌: Minerva-Biolabs®
规格: 25次/盒
用途: 用于【细胞培养中支原体】污染的检测
价格:
****
产品详情
产品说明书
应用文章

常规PCR Kit (一步法)

Venor®Gem OneStep


品名

货号

规格

价格

常规PCR Kit (一步法)

Venor®Gem OneStep

11-8025

25次/盒

询价

11-8050

50次/盒

询价

11-8100

100次/盒

询价

11-8250

250次/盒

询价


常规PCR法介绍

常规PCR法:是根据支原体核糖体16s-23s rRNA的特异保守序列设计引物,对待检样本DNA进行扩增,通过对扩增产物的大小分析作出诊断。

优点:①灵敏度高,特异性好。②时间短,2-3小时出结果。③符合欧洲药典。④操作简单。

缺点:①对于已做支原体灭活处理的样品,由于支原体DNA仍旧存在其中,PCR结果会出现假阳性(可用培养法做补充验证)。②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大(由于引物及内在设计不同),需谨慎选择,尽量在专业人员推荐指导下使用。


『支原体常规PCR检测试剂盒』介绍

德国MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒,依据操作步骤的细微差别,分一步法和经典法两类。此两类试剂盒较全球其他厂家同类产品,具有以下独特的优点:

符合欧洲药典要求。

②高特异性,一次检测即可涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种(涵盖欧洲药典规定的9种支原体),根据序列一致性,至少可以检测到107种支原体物种。操作简单,易于观察(使用MB的试剂盒,下表中列出的支原体物种均为阳性,其他微生物或真核细胞均为阴性,无交叉反应)。


支原体PCR检测试剂盒(一步法)可检测物种


高灵敏度,1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。

试剂盒含内控对照,可防止假阴性的发生。


支原体PCR检测试剂盒(一步法)适用范围

科研用户,细胞上清的筛查可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒(一步法)。(详见下文)

Venor® Gem OneStep (货号:11-8050)】或Venor® Gem Advance (货号: 11-7096)】

B. 对于需遵循药典要求的生物制药企业,可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒(经典法)。

Venor® Gem Classic(货号: 11-1050) 】+ Taq酶   (货号: 53-1050)】

或【Venor® Gem Classic   (货号: 11-1050G)】


支原体PCR检测试剂盒(一步法)特点

1. 内控对照已加在预混液中,无需另外配置,使用便捷。
2.高特异性,仅一条阳性对照条带,即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。

3.操作简单,易于观察。

4.高灵敏度,1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。
5.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。

支原体PCR检测试剂盒(一步法)操作步骤

下列图示以Venor® Gem OneStep
支原体
常规PCR
检测试剂盒
(一步法)( 货号:11-8050)   为例,具体产品操作以说明书为准。

1步:样本处理


2步:试剂制备


3步:PCR体系建立


4步:启动PCR反应


5步:电泳结果分析

191bp为内控对照条带,表明PCR反应正常。

当样本存在支原体污染时,由于内控对照与支原体DNA存在竞争,内控对照条带变弱(例如支原体DNA>10^3拷贝)。

阳性对照中支原体DNA>10^4拷贝,内控对照条带会完全消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带,此条带不影响检测结果。

如果待测样本对PCR产生抑制,则内控对照条带变弱(和阴性对照相比),此时应先进行DNA抽提(推荐使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒),然后再检测。

储存条件

2~8℃至少12个月。复溶后必须在-18℃保存。


效期

1年6个月

(缔一生物)


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